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园艺论文_紫玉兰‘红元宝’花芽分化阶段基因
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摘要:文章摘要:为筛选紫玉兰‘红元宝’(Magnolia liliflora ‘Hongyuanbao’)二次花芽分化阶段稳定表达的内参基因,该文以‘红元宝’不同花芽分化时期的花芽、叶为材料,基于转录组数据,筛
文章摘要:为筛选紫玉兰‘红元宝’(Magnolia liliflora ‘Hongyuanbao’)二次花芽分化阶段稳定表达的内参基因,该文以‘红元宝’不同花芽分化时期的花芽、叶为材料,基于转录组数据,筛选出8个候选内参基因:泛素酶基因(UBC)、肌动蛋白(ACT)、微管蛋白β链(β-TUB)、微管蛋白β-5链(β-TUB5)、微管蛋白α-3链(α-TUB3)、磷酸烯醇丙酮酸羧化酶(PEPC)、酰基载体蛋白2(ACP2)、酰基载体蛋白3(ACP3)。运用Primer Premier 5设计引物,简单克隆和熔解曲线验证引物特异性;利用qRT-PCR技术检测各个候选内参基因的表达情况,结合GeNorm、NormFinder、BestKeeper软件和RefFinder在线工具综合评估其表达稳定性,并通过目的基因TFL1的表达分析验证其可靠性。结果表明:8个候选内参基因条带位置正确,熔解曲线呈单一峰,说明引物特异性良好;综合4个软件的分析结果发现,β-TUB、β-TUB5和α-TUB3是‘红元宝’不同花芽分化时期较为稳定的内参基因,而UBC和ACT为稳定性最差的内参基因;以单个内参基因和β-TUB5、α-TUB3、β-TUB组合为参照对TFL1基因进行相对表达量分析,结果显示,β-TUB5、α-TUB3、β-TUB及其组合的相对表达量趋于一致,而ACT和UBC并未对目的基因的表达量进行有效的标准化。因此,β-TUB、β-TUB5和α-TUB3可作为‘红元宝’二次花芽分化研究中稳定表达的内参基因。该研究结果将为木兰属植物二次成花分子调控机制研究提供依据。
文章关键词:紫玉兰,内参基因,两次成花,qRT-PCR,微管蛋白基因,
论文作者:董彬1,2 张超1,2 张寿洲3 王亚玲4
作者单位:1. 浙江农林大学风景园林与建筑学院 3. 仙湖植物园 4. 西安植物园
论文分类号: S685.15
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文章来源:《植物研究》 网址: http://www.zwyjzz.cn/qikandaodu/2021/0819/1749.html