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30种滇西植物β-羟高铁血红素形成抑制活性

作者:

关键词:

摘要：

XIAO CJ, SHEN Y, XU W， et al.β-hematin formation inhibition activity of thirty plants from West Yunnan [J]. Guihaia， 2019， 39(7): 863-872.

疟疾是一种由疟原虫引起的严重危害人类健康的疾病之一。据世界卫生组织(WHO)统计，全世界91个疟疾流行国家和地区2016年共有2.16亿疟疾病例，因疟疾死亡人数达44.5万。其中，90%的疟疾病例和91%的死亡病例发生在撒哈拉以南的非洲地区，7%的疟疾病例和6%的死亡病例发生在东南亚地区(World Health Organization, 2017a)。另外，2014年全球疟疾病例为2.1亿例，2015年为2.11亿例，2016年为2.16亿例，明显呈现逐年上升的趋势(World Health Organization, 2017a)。在我国，经过几代人的努力，从建国初期疟疾发病人数高达3 000万例到2016年的3 321例来看，我国疟疾防治工作取得了显著成效(张丽等, 2017)。虽然我国疟疾防治工作取得了长足发展，并且2016年99.9%的疟疾病例为境外输入性病例，但在云南边境地区和西藏林芝地区本地疟疾病例依然存在(张丽等, 2017)。加上中国的西藏自治区和云南省地理位置特殊，与印度、尼泊尔、缅甸和越南等周边疟疾高发的南亚、东南亚国家接壤，边民来往十分频繁，传染源输入无法杜绝。因此，我国疟疾防控形势依然不容乐观。

目前，临床用于治疗疟疾的药物主要为奎宁和青蒿素两类(World Health Organization, 2010, 2015)。由于长期使用氯喹和青蒿素，其疟原虫抗药株已逐步显现(Imwong et al., 2017; Price et al., 2014; World Health Organization, 2017b)。因此，研发新一代抗疟药物对疟原虫病防治工作意义重大。研究发现，游离血红素对疟原虫有毒性，疟原虫通过将血红素转换成疟原虫色素(β-羟高铁血红素)的方式解毒(Orjih et al., 1981; Pagola et al., 2000; Slater et al., 1991)。与此同时，奎宁等红内期抗疟药可与血红素络合从而抑制β-羟高铁血红素形成，成为红内期抗疟药物的作用靶点之一(Chong & Sullivan Jr, 2003)。因此，本研究采用β-羟高铁血红素形成抑制实验对30种滇西植物进行抗疟活性筛选，并对活性较好的植物样品进行初步的HPLC分析，以期能发现若干种活性较强的植物，为寻找和开发继奎宁、青蒿素之后的第三代植物来源的新型抗疟天然产物奠定基础。

1 材料与方法

1.1试剂和仪器

试剂：氯高铁血红素、氯喹二磷酸盐、HEPES均购于美国Sigma公司；吡啶、冰醋酸均购于上海申博化工有限公司；乙酸钠购于国药集团化学试剂有限公司；二甲基亚砜购于天津化学试剂有限公司；色谱甲醇购于Fisher Chemical公司；HPLC用水为市售娃哈哈矿泉水。

仪器：BioTek Synergy HT多功能酶标仪为美国BioTek仪器公司生产；MCO-18AIC CO2培养箱为日本三洋公司生产；AL204电子天平为梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司生产；EYELA FDU-2100冷冻干燥机为日本东京理化器械株式会社生产；RE-5205旋转蒸发器为上海亚荣生化仪器厂生产；Agilent 1260高效液相色谱仪为美国安捷伦科技有限公司生产。

1.2植物样品

30种植物样品(表1)均于2013年采自滇西地区，由大理大学药学与化学学院生药教研室张德全博士鉴定，植物标本均存放于大理大学药学与化学学院姜北教授研究组。

表 1 抗疟活性筛选供试植物及其粗提物提取率Table 1 Species and extracting rate of screened plants for anti-malarial activity植物名Plant name科名Family name属名Generic name供试部位Tested parts提取率Extraction ratio (%)乙醇Ethanol水Water西南委陵菜Potentilla lineata蔷薇科Rosaceae委陵菜属Potentilla地上地下反瓣老鹳草Geranium refractum牻牛儿苗科Geraniaceae老鹳草属Geranium地上地下拔毒散Sida szechuensis锦葵科Malvaceae黄花稔属Sida全株高河菜Megacarpaea delavayi十字花科Cruciferae高河菜属Megacarpaea地上滇黄芩Scutellaria amoena唇形科Labiatae黄芩属Scutellaria地上地下土香薷Origanum vulgare唇形科Labiatae牛至属Origanum全株广防风Epimeredi indica唇形科Labiatae广防风属Epimeredi全株曲苞芋Remusatia pumila天南星科Araceae曲苞芋属Remusatia全株接骨木Sambucus williamsii忍冬科Caprifoliaceae接骨木属Sambucus地上云南贯众Cyrtomium yunnanense鳞毛蕨科Dryopteridaceae贯众属Cyrtomium地下四翅月见草Oenothera tetraptera柳叶菜科Onagraceae月见草属Oenothera全株蓝花野茼蒿Crassocephalum rubens菊科Compositae野茼蒿属Crassocephalum全株苣荬菜Sonchus brachyotus菊科Compositae苦苣菜属Sonchus全株挖耳草Carpesium nepalense菊科Compositae天名精属Carpesium全株灯盏细辛Erigeron breviscapus菊科Compositae飞蓬属Erigeron全株一枝箭Crepis napifera菊科Compositae还阳参属Crepis全株玉叶金花Mussaenda pubescens茜草科Rubiaceae玉叶金花属Mussaenda地上木芙蓉Hibiscus mutabilis锦葵科Malvaceae木槿属Hibiscus地上回心草Rhodobryum roseum真藓科Bryacea大叶藓属Rhodobryum全株瑞香狼毒Stellera chamaejasme瑞香科Thymelaeaceae狼毒属Stellera全株大理山梗菜Lobelia taliensis桔梗科Campanulaceae半边莲属Lobelia全株刺天茄Solanum indicum茄科Solanaceae茄属Solanum全株龙葵S. nigrum茄科Solanaceae茄属Solanum全株鞍叶羊蹄甲Bauhinia brachycarpa云实科Caesalpiniaceae羊蹄甲属Bauhinia地上心瓣蝇子草Silene cardiopetala石竹科Caryophyllaceae蝇子草属Silene全株小苞黄芪Astragalus prattii var. prattii豆科Leguminosae黄芪属Astragalus全株姜花Hedychium coronarium姜科Zingiberaceae姜花属Hedychium全株云南甘草Glycyrrhiza pallidiflora豆科Leguminosae甘草属Glycyrrhiza地上虾子花Woodfordia fruticosa千屈菜科Lythraceae虾子花属Woodfordia地上东方紫金牛Ardisia elliptica紫金牛科Myrsinaceae紫金牛属Ardisia地上

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